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ACTIVITÉ TICE : BACTOLAB
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Auteur : Sylvie BORDNER
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1- Présentation :
Dans le cadre de l'utilisation des T.I.C.E en SVT, voici un exemple d'activité en utilisant le logiciel Bactolab distribué par 7P Soft.
2- Objectifs pédagogiques :
Classe concernée : 3ème
Illustrations des thèmes : Partie B : PROTECTION DE L'ORGANISME
--> S ’initier aux techniques de microbiologie sur le logiciel de simulation Bactolab
3- Activité proposés :
-prélever des bactéries et les repiquer sur un milieu de culture gélosé adapté.
-mettre les bactéries en culture.
-effectuer une préparation microscopique à partir d’une souche qui s’est développée dans le milieu.
-réaliser une coloration de Gram.
-observer au microscope (objectif X100)Le but de votre manipulation est de déterminer si vos bactéries sont du groupe Gram+ (coloration en violet) ou Gram- (coloration rouge).
Etape 1 : Démarrage
- Ouvrir le logiciel en suivant les consignes du professeur.
- Dans le fichier « utilisateur », cliquer sur nouvel utilisateur et entrer votre nom .
Votre paillasse apparaît ainsi que votre flacon de prélèvement :
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Etape 2 Prélèvement
-Choisir l’icône bec benzen
et öse
. Allumer le bec benzen en cliquanr sur l'icône
.
-Cliquer sur la réserve Faire glisser une boîte de prélèvement sur la paillasse avec la souris en cliquant dessus et en maintenant le clic enfoncé (choisir œuf ou choco =sang séché ou sang). Fermer la réserve. Cliquer sur la boîte. |
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-Prendre le feutre
et marquer votre boîte (nommer votre prélèvement - exemple:souche N°1) Retourner la boîte et l’ouvrir.
-Attraper l’öse par le manche avec la souris et la faire basculer avec les flèches du clavier. La stériliser sur la flamme en cliquant. Le bout de l’öse devient rouge. Ouvrir le bouchon rouge du prélèvement en cliquant dessus. Laisser refroidir l’öse qui redevient noire et la plonger dans le tube à prélèvement, en appuyant sur la touche ↓ du clavier.
-Faire des stries sur la boîte à Pétri avec le bout de l'öse et en appuyant sur la flèche ↓ du clavier. (voir schéma). Ne pas contaminer les bords de la bôite. Refermer la boîte, la retourner et la reposer sur la paillasse.
-Restériliser l'öse sur la flamme. Ranger le bec benzen et l'öse en cliquant sur les icônes du haut.
Etape 3: Mise en culture
-Cliquer sur l'incubateur(I).Ranger les boîtes dans l'incubateur et ajuster la température entre 20 et 35°C. Fermer l'incubateur avec la croix
.
-Fermer la paillasse avec la croix
et attendre que le message de la coccinelle s'efface.
-Cliquer sur l'icône calendrier
. Faire un saut de 7 jours dans le temps en cliquant 7 fois sur la flèche violette et cliquer sur appliquer.
Etape 4: Préparation microscopique
-Rouvrir votre paillasse
, l'incubateur
et faîtes glisser votre boîte sur la paillasse.
-Fermer l'incubateur avec la croix
.
-Reprendre le bec benzen et l'öse. Allumer le bec et stériliser l'öse.
-Retourner et ouvrir la boîte. Vos colonies de bactéries apparaîssent : chaque disque est une colonie différente.
-Choisir une lame
ouvrir le flacon d'eau (H2O) en cliquant dessus et verser une goutte sur la lame en cliquant sur le compte-goutte.
-Gratter avec l'öse stérilisée une des colonies bactériennes en appuyant sur ↓ et la déposer sur la goutte d'eau de la lame (avec ↓ également). Fixer votre lame 5 à 7 secondes au dessus de la flamme du bec benzen puis marquer-la avec le feutre (ex:souche 1 -choco)
-Ranger l'öse , le bec benzen, ranger la boîte dans l'incubateur.
-Cliquer sur l'icône lame
puis sur l'automate à coloration
.
Etape 5 : Coloration de Gram
-Mettre dans la cuve :
A : violet de gentiane
B : lugol
C : alcool
D : saframine-Pour le bain 1: cliquer sur A puis indiquer le temps: 60 s puis cliquer sur rinçage
-Pour le bain 2: cliquer sur B puis indiquer le temps: 120 s puis cliquer sur rinçage
-Pour le bain 3: cliquer sur C puis indiquer le temps: 10 s puis cliquer sur rinçage
-Pour le bain 4: cliquer sur D puis indiquer le temps: 60 s puis cliquer sur rinçage-Mettre l'automate en marche avec le bouton vert. (M/A)
-Après chaque rinçage, cliquer sur le robinetpour renouveler l'eau.
Etape 6: Observation au microscope
-Cliquer sur l'icône microscope
. Choisir l'objectif 100. Régler la lumière et la mise au point.Vous devez avoir obtenu des bactéries d'une seule espèce que vous pouvez identifier avec les lames de référence. Ce sont des ………………....
Vos bactéries sont colorées en ...............................Vous avez isolé des bactéries Gram.............
Bravo !!